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Histamina · Clorofila · Cianobacterias · Trazadores · Hidrocarburos

Fluorometría:
sensibilidad muy alta cuando la absorbancia se queda corta

Un fluorómetro no mide la luz que la muestra absorbe, sino la que emite después de ser excitada. Como la señal se mide sobre un fondo oscuro, detecta concentraciones cientos o miles de veces menores que un espectrofotómetro.

En el Perú la usan sobre todo las pesqueras para histamina, y quienes vigilan agua: acuicultura, empresas de agua potable, minería y petróleo.

Se usa sobre todo en: Pesqueras y harina de pescado, acuicultura, agua potable y embalses, monitoreo ambiental, minería, petróleo y gas, fisiología vegetal

Cotizar un fluorómetro Histamina en pescado

Qué resuelve la fluorometría

Algunas moléculas, al recibir luz de una longitud de onda, la reemiten en otra más larga. Un fluorómetro ilumina la muestra con la luz de excitación (un LED o una lámpara) y mide, con un filtro o monocromador y un detector, la luz emitida. Como pocas sustancias fluorescen, la técnica es muy selectiva; y como se mide una señal sobre oscuridad y no una pequeña diferencia entre dos señales grandes, es muy sensible. Eso la hace ideal para medir trazas en matrices complejas.

Hay dos grandes familias de equipos. Los fluorómetros de filtros, como el Trilogy de Turner Designs, tienen longitudes de onda fijas por aplicación: son robustos, simples y baratos de operar, y están pensados para análisis de rutina. Los espectrofluorómetros de barrido (PerkinElmer, Shimadzu, Hitachi, Horiba, Agilent) permiten elegir cualquier longitud de onda y registrar espectros: son la herramienta de investigación y desarrollo de métodos. A estos se suman los fluorómetros de campo y las sondas sumergibles, que llevan la medición al estanque, al embalse o al mar, y los fluorómetros PAM, que miden la fluorescencia de la clorofila para evaluar la fotosíntesis.

Aplicaciones típicas de la fluorometría en el Perú

Histamina por fluorometría: la aplicación que más piden las pesqueras

La histamina se forma por acción bacteriana cuando el pescado rico en histidina (atún, bonito, caballa, jurel, sardina, anchoveta, perico) pierde la cadena de frío, y no se elimina con cocción ni congelado. La FDA usa 50 ppm como nivel de acción por descomposición y 500 ppm como nivel de peligro; la Unión Europea exige un plan de nueve muestras por lote con límites de 100 y 200 mg/kg. En harina de pescado, además, los contratos comerciales fijan topes de histamina que se reflejan en el precio.

El método AOAC 977.13 extrae la histamina con metanol, limpia el extracto en una columna de intercambio iónico, la hace reaccionar con o-ftalaldehído (OPA) para formar un derivado fluorescente y la lee a unos 350 nm de excitación y 440 nm de emisión contra estándares. Con un fluorómetro de filtros como el Trilogy de Turner Designs con su módulo de histamina, la lectura es inmediata, el equipo no deriva y la curva queda guardada. Frente al HPLC, que separa varias aminas biógenas y es el método de referencia europeo, es más barato y simple para el control diario; frente a los kits ELISA, usa reactivos genéricos en lugar de kits por lote. Lo explicamos a fondo en la página de Turner Designs.

Qué equipo se necesita según la aplicación

Fluorómetro de mesa de filtros

Para análisis repetitivos en laboratorio: histamina, clorofila extraída, trazadores, turbidez. Robusto, sin deriva y con calibraciones guardadas. Ejemplo: Trilogy.

Espectrofluorómetro de barrido

Para investigación y desarrollo de métodos: espectros de excitación y emisión, mapas 3D, cinética. Más caro y exige un operador especializado.

Fluorómetro de mano

Para decidir en campo: clorofila y ficocianina en estanques y reservorios, rodamina en un canal. Ejemplo: AquaFluor.

Sonda sumergible y plataforma multisensor

Para monitoreo continuo en boyas, perfiladores y estaciones: clorofila, cianobacterias, CDOM, hidrocarburos. Ejemplos: C-FLUOR y C6P.

Fluorómetro PAM

Para fotosíntesis: rendimiento cuántico del fotosistema II en hojas, algas y fitoplancton. Ejemplos: Walz MINI-PAM-II, WATER-PAM-II, PHYTO-PAM-II.

Detector de fluorescencia para HPLC

Cuando hay que separar antes de medir: aflatoxinas, aminas biógenas, vitaminas. Ejemplo: detector RF-20A en sistemas Knauer.

Nuestros fluorómetros: Turner Designs y Walz

Fluorómetros de laboratorio, campo y monitoreo continuo, más fluorómetros PAM para fisiología vegetal y fitoplancton.

Fluorómetro de laboratorio Trilogy — Turner Designs

Fluorómetro de laboratorio Trilogy

Turner Designs · Trilogy

Fluorómetro de mesa con módulos intercambiables: histamina, clorofila, ficocianina, trazadores, hidrocarburos, turbidez y nutrientes.

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Módulo de histamina para fluorómetro Trilogy — Turner Designs

Módulo de histamina para fluorómetro Trilogy

Turner Designs · Trilogy-Histamina

Módulo de histamina para AOAC 977.13: excitación 350 nm, emisión 410-490 nm.

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Fluorómetro portátil AquaFluor — Turner Designs

Fluorómetro portátil AquaFluor

Turner Designs · AquaFluor

Fluorómetro y turbidímetro de mano, dos canales, IP67 y flotante.

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Sonda fluorométrica sumergible C-FLUOR — Turner Designs

Sonda fluorométrica sumergible C-FLUOR

Turner Designs · C-FLUOR

Sonda sumergible C-FLUOR, reemplazo compatible del Cyclops-7F.

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Plataforma multisensor sumergible C6P — Turner Designs

Plataforma multisensor sumergible C6P

Turner Designs · C6P

Plataforma sumergible C6P con hasta seis sensores ópticos.

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Fluorómetro portátil Ballast-Check 2 para agua de lastre — Turner Designs

Fluorómetro portátil Ballast-Check 2 para agua de lastre

Turner Designs · Ballast-Check 2

Ballast-Check 2: verificación indicativa de agua de lastre en menos de un minuto.

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WATER-PAM-II — Walz

WATER-PAM-II

Walz

Fluorómetro PAM multicolor para fitoplancton: distingue algas verdes, pardas y cianobacterias, del laboratorio al monitoreo de floraciones.

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PHYTO-PAM-II — Walz

PHYTO-PAM-II

Walz

Fluorómetro PAM de varias longitudes de onda para diferenciar grupos de fitoplancton en una sola medición.

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MINI-PAM-II — Walz

MINI-PAM-II

Walz

Fluorómetro PAM portátil para medir fotosíntesis y estrés en hojas de cultivos en campo.

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RF-20A fluorescencia Detector — Knauer

RF-20A fluorescencia Detector

Knauer · A59200

Detector de fluorescencia de 200 a 650 nm para HPLC: aflatoxinas y aminas biógenas en alimentos.

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Marcas que podemos cotizar en fluorometría

Turner Designs

Fluorómetros de laboratorio, mano y sumergibles desde 1972: histamina, clorofila, trazadores y agua de lastre.

Cotízala con Solinex

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Walz

Fluorómetros PAM para fotosíntesis en plantas, algas y fitoplancton, de laboratorio y de campo.

Cotízala con Solinex

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Knauer

Sistemas HPLC con detector de fluorescencia para separar y cuantificar compuestos fluorescentes.

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Lumex Instruments

Analizadores de fluorescencia Fluorat-02 y espectrofluorímetro Fluorat-02-Panorama para análisis de aguas y alimentos.

Cotízala con Solinex

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Otras marcas del mercado: PerkinElmer, Shimadzu, Hitachi, Horiba, Agilent

Son las que más vas a encontrar instaladas en laboratorios peruanos. No las representamos, pero sí damos servicio y te decimos cuándo un fluorómetro de filtros resuelve lo mismo con menos complejidad.

PerkinElmer

Espectrofluorómetros de la serie FL y el histórico LS 55, muy usados en universidades.

También la atendemos

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Shimadzu

Espectrofluorofotómetro RF-6000 para investigación y control de calidad.

También la atendemos

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Hitachi y Horiba

Espectrofluorómetros F-7100 (Hitachi) y FluoroMax o Duetta (Horiba) para barridos y mapas de excitación-emisión.

También la atendemos

Agilent

Espectrofluorómetro Cary Eclipse, con buena base instalada en farmacéuticas.

También la atendemos

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Thermo Fisher

Fluorómetros Qubit para cuantificar ADN y proteínas en biología molecular.

También la atendemos

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Kits ELISA para histamina

Neogen Veratox y similares: alternativa por kit para histamina, útil con pocos lotes al mes.

Alternativa de método

Cómo elegir: parámetro, equipo y dónde se mide

Qué necesitas medirDóndeEquipo recomendado
Histamina en pescado y harinaLaboratorio de plantaTrilogy + módulo de histamina (AOAC 977.13)
Histamina y otras aminas biógenas juntasLaboratorio central o de confirmaciónHPLC con detector de fluorescencia (Knauer)
Clorofila a extraídaLaboratorioTrilogy con módulo con o sin acidificación
Clorofila y ficocianina en estanques o reservoriosCampoAquaFluor de dos canales
Floraciones algales en continuoBoya o estaciónC-FLUOR o C6P con datalogger
Grupos de fitoplancton y actividad fotosintéticaLaboratorio o campoWalz WATER-PAM-II o PHYTO-PAM-II
Estrés en cultivosCampoWalz MINI-PAM-II
Trazadores en ríos, canales o relavesCampo y laboratorioAquaFluor o Trilogy con módulo de rodamina o fluoresceína
Espectros y desarrollo de métodosLaboratorio de investigaciónEspectrofluorómetro de barrido

Consumibles y accesorios de fluorometría

Preguntas frecuentes

¿Qué gana un fluorómetro frente a un espectrofotómetro UV-Vis?

Sensibilidad y selectividad. Mide emisión sobre fondo oscuro, así que detecta concentraciones mucho menores, y como pocas sustancias fluorescen hay menos interferencias. A cambio, solo sirve para compuestos fluorescentes o que pueden volverse fluorescentes con un reactivo, como la histamina con OPA.

¿Necesito un espectrofluorómetro para medir histamina?

No. El método AOAC 977.13 trabaja a longitudes de onda fijas, y un fluorómetro de filtros como el Trilogy con módulo de histamina lo resuelve con menos inversión y más simplicidad. El espectrofluorómetro conviene si además haces investigación o desarrollas métodos nuevos.

¿Se puede medir clorofila sin extraer con solvente?

Sí, con fluorometría in vivo directamente sobre la muestra de agua o con una sonda sumergible. Para reportes que exigen método normado se pide la extracción (EPA 445.0), pero para el seguimiento diario de estanques o reservorios la medición directa es suficiente y mucho más rápida.

¿Sirve para medir en campo?

Sí, es una de sus grandes ventajas. Hay fluorómetros de mano a pilas y sondas sumergibles que registran en continuo, muy útiles en acuicultura, en captaciones de agua potable y en estudios con trazadores.

¿Cómo se calibra un fluorómetro?

Con estándares de concentración conocida del analito (histamina, clorofila, rodamina) y un blanco; entre calibraciones se verifica con estándares sólidos secundarios. Te dejamos el procedimiento, los estándares y la verificación periódica documentada.

¿Necesitas medir histamina, clorofila o trazadores?

Cuéntanos qué parámetro, en qué matriz y dónde lo mides (planta, laboratorio o campo). Te respondemos con el fluorómetro adecuado, los consumibles y la capacitación, con cotización en menos de 24 horas hábiles. Atendemos Lima, Arequipa, Trujillo, Piura, Cusco y zonas mineras del interior.

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